Il BCYE (Buffered Charcoal Yeast Extract) è il terreno di coltura selettivo standard per legionella, contenente carbone attivo, estratto di lievito, L-cisteina e pirofosfato di ferro, indispensabili per la crescita del batterio. Le varianti GVPC (con glicina, vancomicina, polimixina B e cicloeximide) e MWY aumentano la selettività riducendo contaminanti. L'incubazione avviene a 36 ± 2 °C in atmosfera umida per almeno 10 giorni, con letture intermedie a 3, 7 e 10 giorni. Le colonie tipiche appaiono biancastre con riflessi iridescenti. Il metodo è quantitativo e permette identificazione di specie e sierogruppo tramite test sierologici sulle colonie isolate. Tempi lunghi sono il principale limite.
COLTURA SU BCYE NELLA GESTIONE DELL'IMPIANTO
Il terreno BCYE interessa al gestore soprattutto per una ragione: determina i tempi di attesa del referto. Poiché le colonie di legionella crescono lentamente, il laboratorio deve incubare le piastre per diversi giorni prima di emettere un risultato definitivo, e questo condiziona la programmazione di riaperture, collaudi e verifiche post-bonifica. Un RSPP che pianifica i controlli dopo una disinfezione deve quindi calcolare circa due settimane fra prelievo ed esito. Un centro sportivo che riapre la piscina coperta a settembre, per esempio, fa eseguire i prelievi delle docce a metà agosto: così dispone del rapporto di prova prima dell'apertura e conserva il margine per un eventuale secondo ciclo di disinfezione.
Errori ed equivoci frequenti
- Pretendere un risultato colturale in 48 ore: con il BCYE le letture definitive richiedono più giorni, e un dato precoce può essere solo preliminare.
- Interpretare una piastra negativa come assenza certa di legionella: forme vitali ma non coltivabili o batteri danneggiati dalla disinfezione possono sfuggire.
FAQ: COLTURA SU BCYE
- Quanto tempo serve per il risultato dell'analisi legionella in coltura?
- Con il metodo colturale previsto dalla UNI EN ISO 11731:2017 le piastre restano in incubazione fino a dieci giorni, a cui si aggiungono le prove di conferma delle colonie sospette. In pratica, fra prelievo e rapporto di prova definitivo trascorrono spesso dieci-quindici giorni, con eventuali comunicazioni preliminari in caso di crescita precoce.
- Cosa sono le colonie presuntive di legionella?
- Sono colonie con aspetto compatibile cresciute sul terreno selettivo, non ancora confermate. Il laboratorio le trapianta su BCYE e su un terreno privo di L-cisteina: la legionella cresce solo sul primo, perché dipende da questo aminoacido. Solo le colonie che superano la conferma entrano nel calcolo delle UFC/L riportate sul rapporto di prova definitivo.
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Sopralluogo, valutazione del rischio, campionamento e referti accreditati ISO 11731 sul tuo impianto.